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導致細胞生長緩慢的常見原因
  • 發布日期:2021-09-24      瀏覽次數:3160
    •   導致細胞生長緩慢的常見原因:
       
        一、培養基可能缺乏細胞生長所需的某種因子,出現這種情況一般都是小伙伴們購買細胞后沒有按照ATCC或國內細胞庫的方法配制培養基,就使用實驗室師兄師姐用的培養基去養細胞。處理方法一般來說就是按照方法配制培養基,或是直接購買所養細胞專用的培養基。
       
        二、細菌、支原體、真菌等污染:雖然現在培養基里面一般都會添加雙抗(和),但是如果無菌操作觀念不強,依然很有可能導致污染。處理方法:如果有凍存的細胞,就可以把污染的細胞丟棄處理,當然,丟棄不是隨意扔進垃圾桶就可以了,要按照實驗室生物安全規范操作進行。然后重新復蘇培養,建議把培養箱進行全面的消毒處理。若是沒有凍存,而這種細胞又是很珍貴的,常見的處理方法就是藥物處理:細菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染就加抗真菌藥物;支原體污染就加抗支原體藥物,具體藥物可以咨詢相關公司的技術支持,他們會比較專業。
       
        三、很多細胞的生長存在密度依賴性,如果傳代后,細胞的密度太小,也是會影響到細胞生長的。這個時候沒什么特別好的處理辦法,只得勤換液。如果細胞培養瓶使用的是T75倒可以消化、離心、重懸,然后接種到T25的培養瓶中培養。
       
        四、凍存細胞DMSO(二甲基亞砜)加的量不正確,沒有逐步梯度降溫。下次復蘇后的細胞總是長不好。處理方法:按照的凍存方式配制凍存液。有的細胞適合10%的DMSO,有的細胞適合5%;嚴格遵守逐步梯度降溫原則,細胞復蘇時快速解凍。
       
        五、換液間隔時間太長,有的小伙伴養細胞真的很“佛系”,想起了就去換個液,信奉一句話“你已經是成熟的細胞了,應該學著自己覓食,成長”。這種情況下細胞培養瓶中就會積累很多細胞代謝廢物,影響細胞活性。建議:勤換液
       
        六、細胞“消化”時間過長,對細胞造成損傷;另外中一般會添加EDTA,螯合鈣離子,影響細胞貼壁。處理方法:控制好細胞“消化”時間,盡量去除干凈和其中的EDTA.
       
        七、PH:細胞需要在一定的PH值下生長,這個道理小伙伴們都懂。但是很多時候PH都是我們忽略的,也是小編今天要強調的一點。我們使用的培養基可能會隨著使用時間的加長而緩慢變堿哦!(當然,也有可能會變酸,但常見的是變堿),一般來說,過堿的培養基會影響到細胞生長。處理方法:簡單的就是換新鮮培養基唄!當然,如果有時間和有條件也可以調一調培養基的PH值。
       
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