Taq酶活性的定義是基于其在特定條件下的催化能力，通常用單位酶活來表示。Taq酶活性檢測方法主要包括以下幾種技術(shù)手段：
一、生物發(fā)光技術(shù)：
1、通過檢測PCR反應(yīng)中產(chǎn)生的焦磷酸(PPi)間接測定酶活性。具體步驟包括：
2、利用ATP硫酰化酶將PPi轉(zhuǎn)化為ATP。
3、通過蟲熒光素酶系統(tǒng)發(fā)光檢測ATP量。
4、繪制焦磷酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算酶活性。
二、熒光定量PCR：
利用擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)強(qiáng)度動(dòng)態(tài)監(jiān)測活性。
三、絕對(duì)活性測定法：
通過dATP消耗量直接計(jì)算活性，適用于精準(zhǔn)定量。
四、功能標(biāo)記檢測：
針對(duì)特定應(yīng)用場景的檢測：
使用基因型與表型方差分析評(píng)估等位變異類型。
通過POD活性等指標(biāo)量化酶功能表現(xiàn)。
五、dNTP摻入法：
標(biāo)準(zhǔn)活性定義方法：
1個(gè)酶單位(U)定義為在74℃下，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP摻入酸不溶物所需的酶量
通過測定dNTP消耗量或DNA合成量計(jì)算活性。
六、質(zhì)量控制檢測：
包括：
1、核酸內(nèi)切酶活性檢測（質(zhì)粒DNA完整性）。
2、非特異性核酸酶活性檢測。
3、宿主DNA殘留檢測（qPCR法）。
不同檢測方法各有優(yōu)劣，生物發(fā)光法靈敏度高但操作復(fù)雜，dNTP摻入法簡便但特異性較低，實(shí)際應(yīng)用中需根據(jù)檢測目的選擇合適方法。?
021-57763112
86-021-57690166
